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氨基液相色譜柱的柱溫改如何選擇呢
更新時間：2021-11-25 點擊次數(shù)：1365次
氨基液相色譜柱的系統(tǒng)由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進樣器進入流動相，被流動相載入色譜柱(固定相)內(nèi)，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對運動時，經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程，各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出，通過檢測器時，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀，數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。
氨基液相色譜柱是高效液相分離系統(tǒng)的中重要的環(huán)節(jié)，業(yè)內(nèi)常把色譜柱比喻為液相色譜的心臟，因為色譜柱的類型決定了色譜系統(tǒng)的性質(zhì)，粒徑和長度影響了分析時間和分析效率。氨基柱、苯基柱、氰基柱等正相色譜柱和C18、C8等反相色譜柱是藥物分析與評價工作中常見的兩類色譜柱。
氨基液相色譜柱柱溫的選擇：
柱溫是影響色譜分離和分析效率的重要參數(shù)，所以要根據(jù)分析目的和被測物性質(zhì)，如：被測物的沸點、被測物極性、被測組分的多少，通過實驗優(yōu)化得到合適的柱溫。相對而言柱流失比較少，可以在較高溫度下工作。分析中通常采用程序升溫模式，從而提高分離度和柱效。
1、初始溫度的選擇：初溫的確定取決于譜圖上較早流出峰的分離度，一般應(yīng)低于樣品中較低沸點組分的溫度；
2、升溫速率的選擇：升溫速率對色譜分離度和峰形的影響較大，對于多組分分析，可以設(shè)置多階、不同升溫速率的升溫程序，以得到較好的分離效果和峰形；
3、終點溫度的選擇：程序升溫溫度的確定主要取決于固定相和被測樣品中較高沸點的物質(zhì)。另外，對于基質(zhì)復(fù)雜的樣品，可以考慮在固定相規(guī)定較高溫度下適當(dāng)提高溫度，并且在此溫度下適當(dāng)延長保持時間。
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